Proč se při Southern blottingu používá nitrocelulózová membrána?
Proč se při Southern blottingu používá nitrocelulózová membrána?

Video: Proč se při Southern blottingu používá nitrocelulózová membrána?

Video: Proč se při Southern blottingu používá nitrocelulózová membrána?
Video: Quick Tips: Considerations for Selecting Nitrocellulose or PVDF to use for Western Blots 2024, Listopad
Anonim

V původním protokolu nitrocelulózová membrána bylo použitý pro blotování v případě Southern blot ale v poslední době nylon membrány byly implementovány pro blotování proces díky jejich schopnosti efektivně vázat větší množství DNA, což umožňuje Southern blot provádět s menším množstvím

Proč se tedy při blotování používá nitrocelulózová membrána?

Nitrocelulózové membrány jsou populární matrice použitý v bílkovině blotování kvůli jejich vysoké vazebné afinitě k proteinům, kompatibilitě s řadou detekčních metod (chemiluminiscenční, chromogenní a fluorescenční) a schopnosti imobilizovat proteiny, glykoproteiny nebo nukleové kyseliny.

Proč se DNA přenáší na nylonovou membránu? Za použití 0,4 M NaOH jako převod rozpouštědlo po krátké předúpravě gelu v kyselině, DNA se depurinuje během převod . Vystavení DNA ultrafialovému světlu, buď v gelu nebo následujícím převod na nylonová membrána , snižuje jeho schopnost hybridizace.

Navíc, jaký je účel Southern blotting?

A Southern blot je metoda používaná v molekulární biologii pro detekci specifické sekvence DNA ve vzorcích DNA. Southern blotting kombinuje přenos elektroforézou separovaných fragmentů DNA na filtrační membránu a následnou detekci fragmentů hybridizací sondy.

Jak pomáhá Southern blotting ve forenzních studiích?

A Southern blot , pojmenované po svém vynálezci Edwinovi Jižní , je metoda používaná ke kontrole přítomnosti specifické sekvence DNA ve vzorku DNA. Jakmile je DNA jedince štěpena specifickým restrikčním enzymem, výsledné fragmenty jsou analyzovány pomocí Southern blot analýza.

Doporučuje: