Proč musí být spektrofotometr nastaven na určitou vlnovou délku?
Proč musí být spektrofotometr nastaven na určitou vlnovou délku?

Video: Proč musí být spektrofotometr nastaven na určitou vlnovou délku?

Video: Proč musí být spektrofotometr nastaven na určitou vlnovou délku?
Video: Hynek Medřický Světlo a tma vliv na volně žijící organismy i člověka 2024, Listopad
Anonim

Když upravíte vlnová délka na spektrofotometr , vy jsou změna polohy hranolu nebo difrakční mřížky tak, že různé vlnové délky světla jsou zaměřené na štěrbinu. Čím menší je šířka štěrbiny, tím lepší je schopnost přístroje rozlišovat různé sloučeniny.

Z toho na jakou vlnovou délku bude spektrofotometr nastaven?

V závislosti na rozsahu vlnových délek světelného zdroje jej lze rozdělit do dvou různých typů: UV-viditelný spektrofotometr: používá světlo v ultrafialovém rozsahu (185 - 400 nm) a viditelném rozsahu (400 - 700 nm ) spektra elektromagnetického záření.

Stejně tak, proč potřebujete kalibrovat spektrometr pokaždé, když změníte vlnovou délku? Spektrofotometr musí být zkalibrované proti slepému roztoku tak že měření poté, co může použít absorbanci slepého roztoku jako nulovou referenci. Míra schopnosti látky absorbovat světlo specifikovaného vlnová délka.

při jaké vlnové délce by měly být odečteny?

Vzít čtení v 5 nm intervalech trochu před a po tomto vlnová délka . Například, pokud byla maximální absorbance nalezena při 450 nm, pak pro získání přesnější čtení λmax, vezměte absorbanci čtení při 440, 445, 455 a 460 nm.

Proč měříte absorbanci roztoku při 550 nm?

Proteiny reagují s ionty mědi zásaditě řešení k vytvoření fialově zbarveného komplexu, který absorbuje světlo 550 nm . Proto tím měření koncentrace komplexu za použití A550 ( Absorbance na 550 nm ), vy jsou také měření koncentraci bílkovin.

Doporučuje: