Existují jiné metody purifikace produktů PCR?
Existují jiné metody purifikace produktů PCR?

Video: Existují jiné metody purifikace produktů PCR?

Video: Existují jiné metody purifikace produktů PCR?
Video: DNA Purification of PCR Product 2024, Listopad
Anonim

Pro aplikace, které vyžadují PCR vyčištění nebo ověření PCR Výsledek, tam jsou dva metody obecně následovalo: PCR produkt izolace pomocí kolony a gelu čištění z agarózového gelu.

Jaký typ chromatografie se zde používá k čištění produktů PCR?

K čištění produktů PCR se používá vylučovací chromatografie. To zachycuje malé molekuly, jako je protein, primery a nukleotidy, zatímco velké molekuly, jako jsou produkty PCR, jsou příliš velké na to, aby vstoupily do kuliček a prošly kolonou do odběrových zkumavek.

Také, jak čistíte DNA? V podstatě můžete očistit vaše DNA vzorky lyzací vašich buněčných a/nebo tkáňových vzorků nejvhodnějším postupem (mechanické narušení, chemické ošetření nebo enzymatické štěpení), izolací nukleových kyselin od jejich kontaminantů a jejich vysrážením ve vhodném pufrovacím roztoku.

Proč dále čistíme produkt PCR?

Očista DNA z a PCR Tato reakce je typicky nezbytná pro následné použití a usnadňuje odstranění enzymů, nukleotidů, primerů a složek pufru. Běžně používané metody využívají spinové kolony obsahující křemičitou matrici, na kterou lze selektivně vázat DNA v přítomnosti chaotropních solí.

Proč se musí DNA čistit?

My čistý nahoru DNA z vodných roztoků k odstranění pufrovacích solí, enzymů nebo jiných látek, které by mohly ovlivnit následné aplikace. Příklady zahrnují PCR reakci čistý nahoru, čistý až po omezení tráví a čistý z genomu nebo plazmidu DNA kontaminované buněčnými proteiny/úlomky.

Doporučuje: