Obsah:

Jak naložíte gelovou elektroforézu?
Jak naložíte gelovou elektroforézu?

Video: Jak naložíte gelovou elektroforézu?

Video: Jak naložíte gelovou elektroforézu?
Video: Agarose Gel Electrophoresis How to load DNA samples 2024, Listopad
Anonim

Vložení vzorků a spuštění agarózového gelu:

  1. Přidat načítání pufr do každého z vašich vzorků DNA.
  2. Po ztuhnutí položte agarózu gel do gel krabice ( elektroforéza jednotka).
  3. Vyplnit gel krabice s 1xTAE (nebo TBE) až do gel je zakryt.
  4. Opatrně zatížení žebřík molekulové hmotnosti do první dráhy gel .

S ohledem na to, kolik DNA potřebujete načíst pro gelovou elektroforézu?

Množství DNA k načtení na jamku je variabilní. Nejmenší množství DNA které lze detekovat ethidum bromidem je 10 ng. DNA množství až 100 ng na jamku povede k ostrému, čistému pruhu na ethidium bromidu obarveném gel.

Proč se navíc při gelové elektroforéze místo vody používá pufr? The vyrovnávací paměť je potřeba k udržení pH roztoku DNA na úrovni blízké neutrální, protože pokud se může stát kyselým elektrolýzou. Mohou způsobit elektrické proudy způsobené elektrodami voda molekuly disociovat a uvolnit H+ ionty.

Lidé se také ptají, proč se při gelové elektroforéze používá marker?

Menší úlomky se pohybují rychleji, a tedy dále, než větší úlomky, když se hadem prodívají gel . Proč se používá značka při průchodu fragmentů skrz gel ? A popisovač obsahuje fragmenty DNA známé velikosti. markery jsou provozovány v každém gel pro srovnání s neznámými fragmenty v jiných gel jízdních pruhů.

Kolik DNA lze vidět na agarózovém gelu?

Většina agarózové gely jsou vyrobeny mezi 0,7 % a 2 %. A 0,7 % gel bude vykazují dobré oddělení (rozlišení) velkých DNA fragmenty (5–10 kb) a 2 % gel bude vykazují dobré rozlišení pro malé fragmenty (0,2–1 kb).

Doporučuje: